Toxicidad de Spinosad en larvas de simúlidos (Simuliidae), susceptibilidad en invertebrados acuáticos y peces.

Las enfermedades transmitidas por vectores como el dengue, virus hemorrágicos y de encefalitis, paludismo, leishmaniasis, oncocercosis y la enfermedad de Chagas son de gran importancia a nivel mundial. El paludismo es una enfermedad endémica de 91 países, el 40 % de la población mundial se encuentra bajo riesgo y cada año se presentan alrededor de 300 millones de casos ; el dengue potencialmente afecta a 2.5 billones en 100 países , se estima que cada año ocurren 51 millones de casos y se calcula que la mitad de la población mundial vive en áreas de riesgo; para la enfermedad de Chagas se estima que existen entre 16 y 18 millones que están expuestos o en riesgo de adquirir una infección en todo el continente americano y de 2 a 3 millones  con infección crónica lo cual causa 45,000 muertes al año; por otra parte los casos para la oncocercosis se estiman entre 20 a 40 millones . La prevalencia de dichas enfermedades es todavía importante en morbilidad, aunque desde hace años las campañas para su control han sido constantes y parcialmente exitosas (Rodríguez-Domínguez, 2002).

La familia Simulidae es responsable de la transmisión de enfermedades parasitarias como filarias, protozoarios y arbovirus, llegan a atacar a una gran variedad de animales domésticos y en  algunas ocasiones a humanos transmitiéndoles la oncocercosis humana o ceguera de río, esta enfermedad es endémica de varios países de África subsahariana, la península arábiga y de algunos países de Latinoamérica, particularmente México, Guatemala y Venezuela. 

Proporción cefálica de larva acuática de Simúlido  

El Programa de Lucha contra la Oncocercosis en África Occidental (OCP) demostró que la mejor manera de controlar las especies de Simúlidos transmisoras de oncocercosis fue atacando sus estados inmaduros. Históricamente el  DDT, Metoxiclor, Abate y Bacilus thuringiensis variedad israelensis (Bti) fueron los principales insecticidas utilizados para el control de larvas de  Simúlidos, pero se ha demostrado que algunas de  las especies han desarrollado resistencia. Dentro de la nueva generación de plaguicidas, llamados productos biorracionales por su bajo impacto ambiental y baja toxicidad se encuentra un producto de origen natural llamado Spinosad que se produce por medio de la fermentación del actinomiceto Saccharopolyspora spinosa, el cual sintetiza una mezcla de macrólidos denominadas espinosinas que han demostrado ser muy efectivos en el control de plagas y algunos vectores como los mosquitos. Spinosad es un insecticida de origen natural que ha mostrado potencial como larvicida para mosquitos.

Estructura química de las espinosinas

Para determinar la actividad del Spinosad contra las moscas negras llamadas simúlidos (orden Díptera: familia Simuliidae), se probaron larvas de último estadio de una comunidad natural que abarcaron principalmente  S.triittatum (63.6%) y otras siete especies, incluyendo tres vectores de la onchocercosis en México (S.metallicum, S. ochraceum y S. callidum). 

Porcentaje de especies de Simúlidos encontrados en el área de estudio    

Fueron sometidas a bioensayos de concentración-mortalidad en laboratorio siguiendo la guía de la organización mundial de la salud. Las mediciones de las capsulas cefálicas  confirmaron la distribución relativamente homogénea de las larvas utilizadas en los experimentos. El 50% de la  concentración letal de Spinosad  fue estimada mediante el análisis logit  en 1.48 ppm (rango de límites de confianza de 2.33 - 1.07).La pendiente de la línea de regresión fue: 0.8925 (±0.1610), mientras que el intercepto fue -0.3250 (± 0.1474)  para un periodo de exposición de 10 min mientras que las larvas tratadas con 0.05 ppm del organofosforado temefos experimentaron 61% de mortalidad.

 Se identificaron Insectos acuáticos inmaduros  a nivel de género, solo la fauna de odonatos se identifico a nivel de especie,  y se probó la susceptibilidad al Spinosad en condiciones de laboratorio.

ORDEN	SUBORDEN	FAMILIAS	GÉNEROS	N
EFEMEROPTERA		Leptophlebidae	Leptohyphes Thraulodes	115 11
		Trycorythidae Baetidae Heptagenidae	Tricorythodes Moribaetis Stenonema	16 3 2
ODONATA	ZYGOPTERA	Calopterygidae Coenagrionidae	Hetaerina Argia	74 1
	ANISOPTERA	Gomphidae Libellulidae	Erpetogomphus Brechmorhoga	1 268
PLECOPTERA		Perlidae	Anacroneura	292
HEMIPTERA		Naucoridae Belostomatidae	Ambrysus Abedus	252 10
MEGALOPTERA		Corydalidae	Corydalus	7
TRICOPTERA		Hydropsychidae Polycentropodidae Lepidostomatidae	Leptonema Polycentropus Lepidostoma	478 14 1
LEPIDOPTERA		Crambidae Pyralidae	NO DETERMINADOS	5 3
COLEOPTERA		Dryopidae Hydrophilidae	Helichus Tropisternus	2 2
TOTAL		19	18	1557

 En  exposiciones siguientes a una concentración de 12 ppm de Spinosad por 10 min (que fue la Lc₉₀ para moscas negras) los efemerópteros, odonatos, tricopteros y hemípteros no experimentaron un incremento significativo en su mortalidad sobre los controles no tratados, por otra parte se observo un incremento significativo en la mortalidad en Plecópteros tratados con Spinosad  (P‹ 0.001). Se probaron alevines de tilapia y trucha arcoíris expuestos a 12 ppm por 10 min, no experimentaron un incremento en la mortalidad después de un periodo de 24 hrs  post-exposición sobre los controles.

En este trabajo se concluye que el Spinosad es mas tóxico que el temefos para las especies de moscas negras antes mencionadas pero puede tener un efecto de bajo impacto en organismos no blanco de la comunidad acuática.

Infante-Rodríguez, D.A., Novelo-Gutiérrez, R., Mercado, G. & Williams, T. (2011) Spinosad toxicity to Simulium spp. larvae and associated aquatic biota in a coffee-growing region of Veracruz State, Mexico. Journal of Medical Entomology 48, 570-576.

Disponible en https://www.academia.edu/17843494/PAPER_Spinosad_Toxicity_to_Simulium_spp._Larvae_and_Associated_Aquatic_Biota_in_a_Coffee-Growing_Region_of_Veracruz_State_Mexico_Impact_Factor_1.953.

DETECCIÓN DE AISLADOS DEL NUCLEOPOLIEDROVIRUS MÚLTIPLE DE Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) POR INCORPORACIÓN DE UN SUELO ARTIFICIAL A DIETA SEMISINTÉTICA PARA

El suelo funciona como reservorio de virus entomopatogenos de lepidópteros plaga. La técnica de detección per os mediante la incorporación de suelos a dieta artificial es un método útil para detección de aislados de baculovirus. En este trabajo se calibró la técnica utilizando una mezcla de suelo artificial a base de 10% (peso/peso) de turba de esfagno, 20% caolinita y 70% arena, como suelo estándar, según las indicaciones de la OECD para la evaluación ecotoxicológica de plaguicidas. Se realizó un experimento de incorporación de suspensiones de poliedros (OBs) del nucleopoliedrovirus múltiple de Spodoptera frugiperda (SfMNPV) en suelo artificial a dieta semisintética. Concentraciones de   1x10⁴, 1x10⁵ OBs/ml no provocaron muertes por infección per os en las larvas de segundo estadio expuestas. En cambio, concentraciones de 1x10⁶ OBs/ml y 1x10⁷ OBs/ml, el porcentaje de larvas infectadas per os fue del 3% y 4% con 4 días de exposición a suelo contaminado con OBs y un periodo posterior a la infección de seis días.

Introducción

La plaga más importante en el cultivo del maíz para Latinoamérica es Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae). También ataca a otros cultivos como sorgo, algodón, soya, papa, jitomate y pastos de forrageo (Martínez, 2003). Este insecto presenta un amplio rango de hospederos y se encuentra ampliamente distribuido en norte, centro y Sur América (Sparks, 1979). La mayoría de aplicaciones de insecticidas químicos en maíz están dirigidas al control de éste insecto. Sin embargo, durante los últimos años se encuentra en desarrollo una alternativa prometedora y sostenible para su control que consiste en un nucleopoliedrovirus múltiple de S.frugiperda (SfMNPV, género Alphabaculovirus, familia Baculoviridae) que causa epizootias en las poblaciones larvarias de este insecto. Experimentos de campo mostraron que la prevalencia de infección en amplios rangos de aplicación de 6x10¹² OBs/ha resulta en aproximadamente el 40% de infección pero la capacidad del virus se encuentra limitada por la degradación ultravioleta a la que se encuentra sujeto (Martínez et al. 2002).

Materiales y métodos

Cría de insectos

Se estableció un pie de cría de S. frugiperda . La colonia se mantuvo a temperatura constante (25 ± 2ºC), y con un fotoperiodo de 16:8 h luz/obscuridad. Las larvas fueron criadas sobre una dieta semisintética adaptada de Caballero et al. (2001).

Amplificación de inoculo viral de nucleopoliedrovirus múltiple de Spodoptera frugiperda (SfMNPV).

Un grupo de 100 larvas de tercer instar de la colonia se colocó individualmente en recipientes plásticos con tapa de 25 ml. A cada recipiente se le agregó una larva y un trozo de dieta artificial contaminado superficialmente con una suspensión de 1 x 10⁸ OBs en un volumen de 10 µl de agua destilada estéril. Cuatro días después de la inoculación se cambió la dieta contaminada por dieta no tratada y se revisó la muerte de las larvas durante los 10 días post-inoculación. Las larvas muertas se colectaron y guardaron a 4°C. Se maceró la larva infectada y se agregó en un volúmen de 500 µl de polisorbato 80 (Tween 80) al 0.1% (vol./vol.). Se agitó en un vortex durante 30 s y después se pasó la suspensión por un filtro de malla plástica para eliminar los restos de tegumento presentes. La suspensión fue centrifugada a 5000 rpm durante 5 minutos y el sobrenadante se desechó. A la pastilla de poliedros se le añadió 500 µl de solución de Tween 80, repitiendo el proceso anterior. Posterior al segundo centrifugado, se lavaron los restos de Tween 80 con 1 ml de agua destilada y se realizó un tercer centrifugado a 5000 rpm. Se resuspendió la pastilla de poliedros con 100 µl de agua destilada y se guardó a 4 ºC. De una alícuota de la suspensión madre se realizaron tres diluciones de 1/10, 1/100, 1/1000. Se realizó un conteo de OBs presentes en la suspensión con la ayuda del microscopio óptico con contraste de fases a 400x y una cámara de conteo Neubauer  en donde se colocaron 10 µl de la suspensión de OBs. Cada conteo se realizó por triplicado. Para calcular la concentración de poliedros en la suspensión se utilizó la siguiente formula: Concentración de poliedros = ( no. poliedros en cámara × 5 × factor de dilución)/1x10e-4. Finalmente se prepararon tres suspensiones para cada una de las siguientes concentraciones de OBs/ml: 1x10⁴, 1x10⁵, 1x10⁶, adicionalmente se prepararon 6 suspensiones de 1x10⁷ OBs/ml, se guardaron a 8°C con tres testigos con 1 ml de agua destilada.

Incorporación de mezclas de OBs y suelo artificial a dieta semisintética e inoculación per os.

Muestras de suelo artificial

Se elaboró una mezcla de suelo artificial a base de 10% (peso/peso) de turba de esfagno, 20% caolinita y 70% arena (OECDE, 1984). Todos los elementos se cribaron en una malla de 2 mm; el esfagno y la arena fueron lavados, secados a temperatura ambiente y se revolvieron manualmente en un recipiente plástico durante 15 min. Una muestra de 25 g de la muestra total de suelo artificial se colocó en un sobre de papel y se pesó para obtener el peso húmedo, posteriormente se dejó secar a 103-105°C durante 24 horas y se pesó de nuevo. Se preparó dieta artificial semisintética y se colocó un volúmen de 50 ml en un recipiente plástico de 250 ml de capacidad. Cuando la dieta alcanzaba una temperatura inferior a 50 °C se incorporaba una muestra de 10 g de suelo artificial contaminado con 1 ml de suspensión de OBs de SfMNPV. La mezcla se revolvió vigorosamente hasta incorporar el suelo contaminado con OBs en la dieta. Un total de 540 larvas de segundo estadio de S. frugiperda se individualizaron y se les colocó un trocito de dieta artificial contaminada durante cuatro días de exposición. Después de este tiempo, se colocaba un trocito de dieta artificial no contaminada, se cambió la dieta cada dos días durante los 10 días posteriores a la exposición. Se registró la mortalidad diariamente.

Tinción de Giemsa en larvas muertas de S. frugiperda

Mediante tinción Giemsa se confirmó que las larvas muertas en el periodo de prueba de diez días, presentaran o no infección por SfMNPV. Para esto, una pequeña porción de la larva fue tomada con la ayuda de un palillo de madera y se realizó un frotis en un portaobjeto. El frotis se fijó con alcohol metílico de 3-4 min. Después se lavó suavemente con agua de grifo. Se agregaron gotas de solución Giemsa y se esperó 30 min. Finalmente el frotis se lavó con abundante agua directo del chorro del grifo para eliminar el exceso de colorante, se secó a temperatura ambiente y se observó al microscopio a 100X con una gota de aceite de inmersión.

Resultados y discusión

Las larvas de segundo estadío aceptaron la dieta y se presentaron pocas muertes por causas no específicas en los testigos (9 individuos) durante el periodo de exposición de 4 días a la dieta con incorporación de suelo más 6 días con dieta artificial. Las demás larvas consumieron la dieta y lograron sobrevivir hasta pupar. Las concentraciones de 1x10⁴, 1x10⁵, 1x10⁶ OBs/ml en suelo artificial no provocaron muertes por poliedrosis. El porcentaje de larvas infectadas de S. frugiperda en el bioensayo de incorporación de mezclas de OBs y suelo artificial a dieta semisintética e inoculación per os fue del 3% en suelo artificial contaminado con 1 ml de suspensión de 1x10⁶ OBs/ml, y de 4% con 1x10⁷ OBs/ml. Después de 4 días de exposición a dieta contaminada y 6 días de observación postratamiento. Esto sugiere que por esta técnica se necesitan concentraciones más elevadas para ampliar el margen de mortalidades. Mediante las tinciones Giemsa se confirmó que la muerte de algunas larvas fue por infección de SfMNPV. 

El suelo representa el principal reservorio de muchos virus patógenos de insectos. Los mecanismos de transferencia de virus hacia las plantas han sido poco estudiados pero existe evidencia que algunos baculovirus son transferidos con partículas de suelo, donde se dan interacciones entre minerales en suelos arcillosos con alto contenido de óxidos férricos, atapulgita y caolinita (Christian, 2006) y los microorganismos, humedad y tipo de suelo, pueden afectar la supervivencia de virus en el suelo (Peng et al., 1999). La técnica de incorporación a dieta de Richards y Christian (1999) adaptada por Murillo et al. (2007) demostró tener más sensibilidad que técnicas basadas en PCR o procesos complejos descritos por Ebling y Holmes (2002).

La presencia de poliedros de SfMNPV en suelos de la región del Soconusco Chiapas y la presencia de diferencias polimórficas fue demostrada en trabajos de Jiménez (2003) demostrando que existen cepas silvestres del virus, donde el suelo es el principal reservorio dentro del agroecosistema, en el cual la concentración promedio se encuentra entre 7.0 x 10⁵ y 3.0 x 10⁶ OBs/10g de suelo. El hecho de utilizar un suelo estándar facilita los estudios de laboratorio y brinda una metodología sencilla pero de gran utilidad para el entendimiento de los procesos que modulan la interacción poliedro-suelo de gran importancia ecológica para el virus y las poblaciones del insecto huésped.

Conclusiones

Se observaron 3-4% de muertes por la presencia de SfMNPV en  larvas de S. frugiperda de segundo estadio alimentadas per os con un suelo artificial contaminado con poliedros de SfMNPV. Las concentraciones de 1x10⁴, 1x10⁵, 1x10⁶ OBs/ml en suelo artificial no provocaron muertes por lo que en los estudios futuros se utilizarán concentraciones mayores a 1x10⁷ OBs/ml para generar mortalidades elevadas por esta técnica.

Literatura citada

              

Caballero, P., López–Ferber, M. y Williams, T. (2001). Los baculovirus y sus aplicaciones como bioinsecticidas en el control biológico de plagas. Ed. M.V. Phytoma-España, 518pp.

Christian, P., Richards, A., y Williams, T. (2006). Differential adsorption of occluded and nonoccluded insect-pathogenic virus to soil-forming minerals. Appl. Environ. Microbiol. 72: 4648-4652.
Jiménez Fernández, J.A. (2003). Aislamiento y polimorfismo genético del nucleopoliedrovirus de Spodoptera frugiperda (SMITH) en 9 municipios de la región del Soconusco Chiapas, México. Tesis de licenciatura. Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas. 82 pp. 

Martínez Castillo, A. (2003). Lethal and sublethal interaccions between optical brighteners and nucleopolyhedrovirus in Spodoptera frujiperda (J.E.Smith) (Lepidoptera: Noctunidae) Tesis doctoral. Departamento de Producción Agraria Universidad Pública de Navarrra. 111 pp.
Martínez, A.M., D. Goulson, J.W. Chapman, P. Caballero, R. Cave, and Williams T.(2002). Is it feasible to use optical brightener technology with a baculovirus insecticide for resource-poor maize farmers in Mesoamerica? Biol. Contr.17:174-181.
Murillo, R., Elvira, S., Muñoz, D., Williams, T., y Caballero, P. (2006). Genetic and phenotypic variability in Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus isolates from greenhouse soils in southern Spain. Biol. Control 38:157-165.
Organization for Economic Cooperation and Development (OECD). 1984. Earthworm, acute toxicity test. Guidelines for testing of chemicals N°207. OCDE, París, 9 pp.
Peng F., Fuxa J.R., Richter A.R. y Johnson, J. (1999). Effects of heat-sensitive agents. Soil type, moisture, and leaf surface on persistence of Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae) nucleopolyhedrovirus. Environ. Entomol. 28:330-338.
Richards, A.R., Christian, P.D. (1999). A rapid bioassay screen for quantifying nucleopolyhedroviruses (Baculoviridae) in the environment. J. Virol. Meth. 82:63-75.
Sparks, A.N. (1979). A review of the biology of the fall armyworm.  Fla.  Entomol. 62:82-87. 

1. 
   

Spodoptera frugiperda - una plaga importante del maíz.

 El gusano cogollero Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) es una especie polífaga originaria de América y ampliamente distribuida por regiones tropicales y subtropicales. En su forma adulta es capaz de migrar grandes distancias durante los meses de verano. Este insecto tiene un amplio rango de hospederos, sin embargo durante sus estadios larvarios prefiere alimentarse de plantas de las familias Fabaceae, Poacae y Graminaceae. Dentro de los principales cultivos que se ven mermados por esta especie se encuentran el maíz, sorgo, algodón, soya, papa, tomate y pastos forrajeros (Sparks, 1979, Van Huis 1981, Pashley, 1988, Martínez-Castillo, 2003). En México es un serio problema en casi todos los estados con producción de maíz (Andrews, 1988).
El ciclo de vida de S. frugiperda tiene una duración de 30 días, pero la fenología del cultivo y la temperatura ambiente son los principales factores que afectan al desarrollo de la larva, alimentación, longevidad, fecundidad y viabilidad de los huevos. Los huevos se encuentran cubiertos con escamas de coloración gris-rosada y se ponen en masas de 70 a 300 (Fig. 1). La eclosión de los huevos se da entre 3 y 5 días y pasan por 5 o 6 estadios larvarios antes de completar su desarrollo en aproximadamente 20 días. Las larvas pupan en el suelo y este estado se extiende durante 9 a 13 días. Los adultos o palomillas nocturnas miden entre 28-32 mm, son de colores café grisáceo o beige, con marcas oscuras y rayas pálidas en la parte central de las alas, las alas traseras presentan una coloración blanquecina (Jiménez, 2003).

Estadíos de desarrollo de Spodoptera frugiperda: a) huevos; b) larvas; c) pupa; d) adulto y larva provocando daños al maíz (e, f)

La mayoría de las aplicaciones de insecticidas químicos en maíz están dirigidas al control de este insecto. Sin embargo, durante los últimos años se encuentra en desarrollo una alternativa prometedora y sostenible para su control que consiste en un nucleopoliedrovirus múltiple de S. frugiperda (SfMNPV, género Alphabaculovirus, familia Baculoviridae), que causa epizootias en las poblaciones larvarias de este insecto (Williams et al., 1999; Barrera et al., 2011).

Cadáver de una larva de Spodoptera frugiperda presentando licuefacción característica por infección de SfMNPV.

Experimentos de campo mostraron que la prevalencia de infección en amplios rangos de aplicación de 6x10¹² poliedros/ha resulta en aproximadamente el 40% de infección pero la capacidad del virus se encuentra limitada por la degradación ultravioleta a la que se encuentra sujeto (Martínez et al. 2002), no obstante mediante el uso de abrillantadores ópticos se ayuda a incrementar la capacidad insecticida (Martínez, 2003).

Melo-Molina (2001) realizó estudios sobre la factibilidad de detectar la presencia de  baculovirus de  S. frugiperda en muestras de suelo tomadas en el sureste de México y Centroamérica obteniendo con este estudio cepas provenientes de Chiapas, Campeche, Mérida , Quintana Roo y Guatemala, demostrando la existencia de  diferencias polimórficas entre las cepas de virus de la misma zona geográfica. 

adaptada de http://www.trevorwilliams.info/Ecology_baculoviruses.htm

Estudios recientes en Colombia y Brasil presentan clara evidencia que existen polimorfismo en el nucleopoliedrovirus múltiple de S.frugiperda , una nueva cepa aislada en 2011 en Colombia (cepa SfCOL) es más potente en términos de concentración-mortalidad que la cepa SfNIC, demostrando que existen aislados geográficos con  amplio potencial bioinsecticida (Barrera et al., 2011).

Larva sana consumiendo suelo + dieta (a.) Larva L₃ muerta después de 4 días de exposición (b.)  Característica típica de infección por SfMNPV-NIC (c.) larva presentando comportamiento característico del cuerpo flácido colgado y ruptura del cadáver liberando el líquido con millones de cuerpos de inclusión (d.-f.)  Frotis con tinción giemsa positivo a SfMNPV visto a 1000x (e.)  

REFERENCIAS:

Barrera, G., Simón, O., Villamizar, L., Williams, T., y Caballero, P. (2011). Spodoptera frugiperda nucleopoliedrovirus as a potencial biological insecticide: Genetic and phenotypic camparasion of field isolates from Colombia. Biological Control. 58:113-120 

Jiménez Fernández, J.A. (2003). Aislamiento y polimorfismo genético del nucleopoliedrovirus de Spodoptera frugiperda (SMITH) en 9 municipios de la región del Soconusco Chiapas, México. Tesis de licenciatura. Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas. 82 pp.  

Martínez-Castillo, A. (2003). Lethal and sublethal interaccions between optical brighteners and nucleopolyhedrovirus in Spodoptera frugiperda (J.E.Smith) (Lepidoptera: Noctunidae) Tesis doctoral. Departamento de Producción Agraria Universidad Pública de Navarrra. 111 pp.

Melo Molina, G. (2001). Desarrollo de una metodología para la detección de baculovirus del gusano cogollero en muestras de suelo. Proyecto de investigación. Instituto Tecnológico de Tuxtla Gutierrez.72 pp.

Sparks, A.N. (1979). A review of the biology of the fall armyworm.  Fla.  Entomol. 62:82-87.

Spodoptera exigua : aislamiento y caracterización de genotipos nativos del núcleopoliedrovirus múltiple de Spodoptera exigua (Lepidoptera: Noctuidae) (SeMNPV)

El gusano soldado, Spodoptera exigua (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) es una plaga polífaga en vegetales y cultivos ornaméntales.  Es originaria del sudeste de Asia pero actualmente se encuentra en regiones tropicales y subtropicales de todo el mundo. En Norte y Centroamérica se encuentra vigente durante todo el año, durante junio a octubre causa pérdidas económicas por agregaciones abundantes en cultivos de pimiento, tomate, calabacita, sandía, melón, entre otros. Causando daños severos por defoliación en las plantas hospederas (Belda 1994, Lasa et al. 2007).

Larvas infectadas por SeMNPV

El control de esta especie es costoso y difícil; los agricultores tratan de evitar o reducir pérdidas económicas ocasionadas por la infestación de S. exigua mediante aplicaciones frecuentes de insecticidas químicos de amplio espectro como los organofosforados o piretroides y más recientemente la nueva generación de insecticidas biorracionales como spinosad, indoxicarb, methoxyfenozide entre otros. No obstante, el uso prolongado de estos insecticidas ha generado grados variables de resistencia a los insecticidas en poblaciones de esta especie (Caballero et al. 2009).

Control biológico : ¿cómo se ven los baculovirus a un microscopio?

Si detectamos la presencia de una larva que creemos infectada por Baculovirus, es muy útil realizar un fortis para corroborarlo.

Aquí les presento fotos de frotis observados en un microscopio de contraste de fases (100X) de los cuerpos de inclusión (OB's)  teñidos en colorante giemsa con el método de la gota gruesa.

¿ El Control biológico es posible mediante depredadores de larvas infectadas por Baculovirus?

¿ QUE SABEMOS DE LOS DEPREDADORES  QUE CONSUMEN LARVAS INFECTADAS POR BACULOVIRUS?

Para la mayoría de los baculovirus el principal reservorio de poliedros es el suelo. Aquí pueden persistir por periodos más o menos largos, aunque afectados por factores tales como valores extremos de pH, altas temperaturas, tipo de suelo y elevada humedad, o degradación por microrganismos (Fuxa, 2004; Caballero et al., 2009). Los poliedros pasan a través del intestino de depredadores sin una pérdida significativa de infectividad (Beekman; 1980; Abbas, 1988; Castillejos et al., 2001). Esto se debe a que la mayoría de los insectos depredadores tienen un intestino ácido. En cambio, la alta alcalinidad en los intestinos de lepidópteros fitófagos degrada la matriz proteínica de los poliedros, resultando en la liberación de viriones y la subsecuente infección de células del intestino del hospedero (Granados y Lawler, 1981). 

FOTOS: Dr. Rodrigo Lasa 

Existe una cantidad variable de factores que influencian la dispersión de baculovirus. Diferentes estudios han demostrado que los depredadores son agentes importantes en la diseminación de virus en ambientes agrícolas y boscosos. Algunas aves y parasitoides parecen actuar como vectores de baculovirus a grandes distancias.

FUENTES: 

Abbas, M. S.T., 1988. Interactions between nuclear polyhedrosis virus, host and predators. Zeitschrift Für Pflanzenkrankheiten und Pflanzenschutz 95: 606-610.

Beekman, A.G., 1980. The infectivity of polyhedral of nuclear polyhedrosis virus (N.P.V.) after passage through the gut of an insect predator. Experientia 36:858-859.

Caballero, P., López–Ferber, M. y Williams, T. (2001). Los baculovirus y sus aplicaciones como bioinsecticidas en el control biológico de plagas. Ed. M.V. Phytoma-españa 518pp.

Castillejos, V., García, L., Cisneros, J., Goulson, D., Cave, D.R., Caballero, P. y Williams, T. (2001). The potential of Chrysoperla rufilabris and Doru taeniatum as agents for  dispersal of Spodoptera frugiperda nucleopolyhedrovirus in maize. Entomologia Experimentalis et Applicata 98: 353-359.

Fuxa, J.R. (2004). Ecology of insect nucleopolyhedroviruses. Agric. Ecosyst. Environ. 103:27-43.